Pisang merupakan salah satu tanaman
pangan hortikultura yang banyak di
budidayakan dinegara kita . Tanaman daerah
tropis ini tidak memerlukan persyaratan
khusus, agar dapat tumbuh dan berproduksi
dengan baik, asal tanahnya tidak tergenang air
atau berbatu-batu yang bisa mempengaruhi
perkembangan akar, sehingga dapat
menurunkan produksi tanaman. Dinegara kita
ada berbagai macam varietas pisang,
namun di Provinsi Kalimantan Timur yang
banyak dan disenangi warga yaitu pisang
kepok kuning yang menjadi Primadona
Kaltim, sebab dapat cepat mengenyangkan
disebabkan kandungan karbohidratnya yang
tinggi, rasanya pun enak terlebih lagi bila
sudah matang. Buah pisang dapat dipakai
sebagai makanan substitusi bagi yang sedang
diet lemak sebab kadar kolesterolnya yang
sangat rendah ,
Selain sebagai produk pangan untuk
memenuhi kebutuhan warga , juga sebagai
salah satu komoditi hortikultura yang
dipasarkan warga ke luar provinsi
Kalimantan Timur antara lain: Pulau Jawa,
Sulawesi, Kalimantan Selatan. Dengan
demikian merupakan sumber pendapatan
(Income) tambahan bagi warga
terutama petani, selain produk pertanian
lainnya. Namun keadaan ini tidak
berkepanjangan, sebab pada tahun 2000,
kebun pisang warga Kaltim terserang
penyakit layu, sehingga walaupun
berproduksi namun buahnya tidak dapat
dikonsumsi sebab bagian dalam buah
busuk dan berwarna hitam, tampaknya
warna ini mulai berkembang dari akar
ke tengah batang sampai ke titik tumbuh dan
buah. Baru kurang lebih lima tahun akhir ini
serangan mulai sedikit berkurang. Namun
serangan penyakit ini belum punah sama
sekali, walaupun para ahli proteksi tanaman
telah berusaha mengatasinya. Oleh sebab itu,
perlu dicari alternatif lain untuk mengatasi
penyakit yang sangat merugikan
perekonomian warga tani ini, dengan
memakai bibit tanaman yang bebas
penyakit.
Teknologi kultur jaringan merupakan
salah satu dimensi baru yang dapat ditempuh
untuk mengatasi penyakit ini , sebab
melalui metode ini dapat diperoleh bibit
tanaman pisang yang bebas penyakit,
pertumbuhannya seragam sehingga panen pun
dapat serempak. Penggunaan metode ini tidak
memerlukan tempat yang luas, cukup hanya
dibotol-botol kultur dalam laboratorium kultur
jaringan dengan media tumbuh dilengkapi zat
pengatur tumbuh dan lingkungan yang steril ,
Bila bahan tanaman (eksplan)
yang diregenerasikan cocok tumbuhnya
dengan media tumbuh, maka sesudah beberapa
waktu akan tumbuh plantlet yang yang akan
menjadi bibit tanaman yang bebas penyakit.
sesudah beberapa subkultur (pindah tanam ke
media baru), plantlet siap diaklimatisasi
(adaptasi plantlet dengan lingkungan luar).
Bila tumbuhnya sehat dan tegar dapat
dipindahkan ke lapangan sampai
berproduksi. Sewaktu tumbuh di lapangan
perlu pemeliharaan yang intensif dengan
memperhatikan sanitasi dan proteksi tanaman
sampai panen. Pada penelitian yang akan
dilaksanakan nanti, akan ditindak lanjuti
dengan pengolahan hasil pasca panen selain
buah juga bonggolnya menjadi produk olahan
yang bernilai ekonomis tinggi, sehingga
memberikan nilai tambah bagi yang
mengusahakannya. Dengan demikian
penelitian ini lengkap mulai produksi bahan
tanaman (industri hulu) ke produksi makanan
jadi (industri hilir).
Sebelum adanya wabah serangan
penyakit layu pada pisang di Kaltim, pernah di
lakukan penanaman pisang ambon di lapangan
asal bibit kultur jaringan, hasilnya cukup baik
tidak ada serangan penyakit. Keadaan ini
membuktikan bahwa pisang asal bibit kultur
jaringan ini tahan penyakit. Oleh sebab itu,
sekarang dicoba lagi untuk meneliti pada
varietas lain yaitu kepok kuning yang
tampaknya rentan terhadap penyakit layu,
sebab walaupun pada species tanaman yang
sama, namun bila varietasnya berbeda,
berbeda pula keperluan formula media untuk
induksi regenerasi bahan tanaman (eksplan)
menjadi plantlet (tanaman mini) di media
kultur, demikian pula daya tahannya terhadap
serangan hama dan penyakit di lapangan.
Keadaan ini sebab masing-masing varietas
mempunyai jalur biokimia internalnya yang
berbeda.
Tujuan penelitian yaitu :
1. Untuk menemukan formula induksi
regenerasi eksplan (bahan tanaman)
menjadi plantlet pisang (tanaman mini di
lab kultur jaringan) yang kemudian menjadi
bibit pisang bebas penyakit sesudah proses
aklimatisasi (adaptasi ke lingkungan luar)
di nurseri. (tahun ke 1)
2. Untuk memperoleh kuantitas dan kualitas
hasil panen yang tinggi, sesudah bibit dari
nurseri dipindah tanam di lapangan sampai
panen. (tahun ke 2)
3. Mengolah hasil pasca panen buah dan
bonggolnya menjadi bermacam-macam
produk olahan yang bernilai ekonomis
tinggi dan digemari warga . (tahun ke
3)
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan secara bertahap
dan berkesinambungan dalam waktu tiga
tahun. Tahun pertama yaitu untuk
menentukan formula induksi regenerasi
eksplan (bahan tanaman) pisang kepok kuning
menjadi plantlet (bibit tanaman lengkap mini)
yang terbanyak dan bebas penyakit di
laboratorium kultur jaringan. Penelitian
dilaksanakan di laboratorium kultur jaringan
dan para-para FakultasPertanian Universitas
Mulawarman Samarinda, yang dimulai bulan
Maret sampai November2015.
Bahan dan Alat.
Bahan yang diperlukan berupa: inti dari
bonggol pisang yang sehat dan tegar tidak
terkontaminasi penyakit dan hama, alkohol
(95%dan 70 %), spiritus, medium Murashige
dan Skoog, aquades, kapas, tissue, detergen,
Clorox atau bayclin, tween 20, vitamin C atau
ascorbic acid, antibiotic amoxylin, korek api,
dan karet gelang.
Alat yang diperlukan berupa: Laminar
air flow cabinet, erlenmeyer, cawan petridish,
gelas ukur, gelas piala, botol kultur, waskom,
pinset, scalpel, lampu bunsen, pisau, autoklaf,
pH meter, timbangan analitik, kompor listrik,
dan pipet.
Rancangan Percobaan dan Rancangan
Perlakuan
Rancangan yang dipakai dalam
penelitian ini yaitu Rancangan Acak Lengkap
dengan 9 kombinasi perlakuan yang diulang
10 x, sehingga ada 90 populasi (botol
kultur), yaitu :
Perlakuan 1 = 2,5 ppm BAP + 0 ppm IBA
Perlakuan 2 = 2,5 ppm BAP + 1,0 ppm IBA
Perlakuan 3 = 2,5 ppm BAP + 2,0 ppm IBA
Perlakuan 4 = 5 ppm BAP + 0 ppm IBA
Perlakuan 5 = 5 ppm BAP + 1,0 ppm IBA
Perlakuan 6 = 5 ppm BAP + 2,0 ppm IBA
Perlakuan 7 = 10 ppm BAP + 0 ppm IBA
Perlakuan 8 = 10 ppm BAP + 1,0 ppm IBA
Perlakuan 9 = 10 ppm BAP + 2,0 ppm IBA
Pelaksanaan Penelitian
1. Persiapan : persiapan pembuatan medium
regenerasi, sterilisasi medium, sterilisasi
alat logam dan gelas, sterilisasi aquades dan
mempersiapkan eksplan (bahan tanaman).
Sterilisasi medium dilakukan di dalam
autoklaf dengan temperatur 121°C dengan
tekanan 15 psi dalam 30 menit, sedangkan
untuk sterilisasi alat dan aquades selama 60
menit.
2. Sterilisasi eksplan dan inokulasi
(penanaman eksplan pada medium tumbuh
di botol-botol kultur)
3. Pemeliharaan : pengendalian lingkungan
dari kontaminasi mikrobia , dengan
menyemprotkan alkohol 70 % sekali
sehari, disekitar botol – botol kultur yang
berisi eksplan.
Pengambilan Data
Pengamatan dan pengumpulan data
dilakukan pada seleksi daya regenerasi
eksplan tentang pengaruh perlakukan
kombinasi Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) BAP
dan IBA terhadap pertumbuhan dan
perkembangan eksplan kepok kuning dalam
media kultur baik secara kuantitatif maupun
kualitatif.
1. Kuantitatif meliputi :
Jumlah eksplan yang membengkak, jumlah
eksplan yang merekah, kecepatan
pembentukan kalus, kecepatan
pembentukan tunas, jumlah tunas,
kecepatan pembentukan akar.
2. Kualitatif meliputi :
Warna kalus dan struktur kalus
Pengamatan ini diatas dilakukan
seminggu sekali, sedangkan perhitungan
jumlah tunas pada akhir penelitian.
Aklimatisasi
“Plantlet” yang tegar dan sehat
dipindahkan ke lapangan (pot tumbuh) namun
sebelum diadaptasikan terlebih dahulu pada
media tumbuh yang faktor lingkungan
tumbuhnya terkendali, baik intensitas cahaya
maupun kelembabannya.
“Planlet” dikeluarkan dari kultur kemudian dicuci bersih, selanjutnya ditanam pada pot
Plastik yang berisi media tumbuh campuran
tanah; kompos; pasir = 1: 1 :1, yang telah
disterilkan. Planlet yang telah ditanam,
disemprot dengan aquades steril dan diberi
pupuk gandasil seminggu sekali, kemudian pot
disungkup dengan sungkup plastik untuk
mengurangi penguapan, kemudian pot
diletakan di bawah naungan untuk mencegah
serangan penyakit dilakukan penyemprotan
dithane M-45 1 gram/liter. sesudah bibit
berumur dua minggu diaklimatisasi, sungkup
plastik dibuka 1 jam per hari, semakin lama
waktu pembukaan sungkup ditambah,
perlakuan ini berlangsung sampai bibit mampu
tumbuh dengan baik tanpa diberi sungkup lagi.
Pertumbuhan dan perkembangan
Eksplan Pisang Dalam Media Kultur yang
diberi kombinasi perlakuan ZPT BAP dan
IBA.
Pembengkakan
sesudah bahan tanaman (eksplan) pisang
yang berupa titik tumbuh ditanam
(diinokulasi) pada media tumbuh komposisi
Murashige dan Skoog (MS) yang dilengkapi
perlakuan beberapa, kombinasi ZPT sitokinin
berupa Benzyl Amino Purine (BAP) untuk
menginokulasi pertunasan dan auksin berupa
Indole Butyric Acid (IBA) untuk menginduksi
perakaran maka Eksplan ini sesudah 3
(tiga) hari kemudian mulai menunjukkan
pembengkakan sebab imbibisi air dari media
tumbuh, pembengkakan ini diamati terus
seminggu sekali, seperti terlihat pada Tabel 1
dibawah ini.
Tabel 1. Rata-Rata Persentase Tumbuh Eksplan Pisang Yang Membengkak Pada Umur 3, 10, 17,
dan 24 Hari sesudah Tanam (%)
Kombinas Perlakuan Konsentrasi ZPT Pembengkakan ( % )
3 HST 10 SHT 17 HST 24 HST
I. BAP 2,5 ppm + IBA 0 ppm 30 40 60 100
II. BAP 2,5 ppm + IBA 1,0 ppm 30 40 50 100
III. BAP 2,5 ppm + IBA 2,0 ppm 20 20 50 100
IV. BAP 5,0 Ppm + IBA 0 ppm 30 30 60 90
V. BAP 5,0 ppm + IBA 1,0 ppm 20 20 40 90
VI. BAP 5,0 ppm + IBA 2,0 ppm 20 20 50 90
VII. BAP 10,0 ppm + IBA 0 ppm 20 30 80 90
VIII. BAP 10,0 ppm + IBA 1,0 ppm 30 30 70 90
IX. BAP 10,0 ppm + IBA 2,0 ppm 30 40 70 90
Dari Tabel 1 tampak bahwa mulai umur
3 (tiga) HST eksplan yang diinokulasi pada
media kultur mengalami pembengkakan
sebab telah menyerap air dan nutrisi dari
media tumbuh sebagaimana biji yang
berkecambah, sesuai yang dinyatakan
Dwijosaputro (1989), biji yang berkecambah
akan memulai aktifitas tumbuhnya dengan
pembengkakan sesudah imbibisi air sebelum
proses perkecambahan lebih lanjut.
Eksplan pisang yang diinokulasi pada 9
(sembilan) perlakuan kombinasi konsentrasi
ZPT menunjukkan respon pembengkakan
yang bervariasi, pada umur 3 HST yaitu 20 s/d
30%, semakin lama semakin meningkat. Pada
umur 10 HST yaitu 20 s/d 40%, pada umur 17
HST yaitu 40 s/d 50%, sedangkan pada umur
24 HST hampir semua eksplan mampu
membengkak yaitu 90 s/d 100%. Hal ini
menunjukkan bahwa sel-sel penyusun eksplan
masih hidup, walaupun telah diperlakukan
sterilisasi dengan bahan kimia, untuk
menghambat atau mematikan mikroba yang
berasal dari lapangan.Eksplan yang
mengalami pembengkakan dapat dilihat pada
Gambar 2.
pemekaran
Perkembangan pembengkakan eksplan
yang diinokulasi dalam media kultur mulai
dari 3, 10, 17, dan 24 HST dari 9 (Sembilan)
kombinasi zpt BAP dan IBA dapat dilihat pada
gambar 3.
Merekah
Pada pertumbuhan yang lebih lanjut
dari eksplan pisang yang diinokulasi pada
perlakuan kombinasi konsentrasi ZPT BAP
dan IBA eksplan tampak mulai mengalami
pemekaran (merekah) sebab titik tumbuh
pada inti bonggol pisang ini sesuai dengan
bentuk morfologinya dilindungi oleh kelopak-
kelopak, sehingga sesudah mengalami
pembengkakan sebab imbibisi air media
tumbuh, proses lebih lanjut akan merekah.
Persentase kemampuan merekah ini bisa
dillihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Rata-Rata Persentase Eksplan Pisang Yang Merekah Pada Umur 31 HST, 38 HST, 45
HST, dan 52 HST.sesudah Diinokulasi Dalam Media Kultur MS yang Dilengkapi Berbagai
Perlakukan Kombinasi Konsentrasi Zat Pengatur Tumbuh BAP dan IBA (%).
Kombinasi perlakuan konsentrasi ZPT Merekah ( % ) 35 HST 38 HST 45 HST 52 HST
I. BAP 2,5 ppm + IBA 0 ppm 20 30 60 100
II. BAP 2,5 ppm + IBA 1,0 ppm 20 20 60 100
III. BAP 2,5 ppm + IBA 2,0 ppm 20 40 50 100
IV. BAP 5,0 Ppm + IBA 0 ppm 20 40 50 100
V. BAP 5,0 ppm + IBA 1,0 ppm 20 40 60 100
VI. BAP 5,0 ppm + IBA 2,0 ppm 20 30 60 100
VII. BAP 10,0 ppm + IBA 0 ppm 30 50 80 100
VIII. BAP 10,0 ppm + IBA 1,0 ppm 30 50 70 100
IX. BAP 10,0 ppm + IBA 2,0 ppm 30 50 60 100
Dari tabel 2 tampak bahwa eksplan
pisang yang diinokulasi pada berbagai
perlakuan kombinasi konsentrasi ZPT,
mengalami perubahan morfologi yang lebih
lanjut akibat proses imbibisi air media tumbuh.
Sama halnya dengan persentase kemampuan
pembengkakan, maka persentase merekah pun
bervariasi sebagai responnya terhadap
perlakuan.Pada umur 31 HST yaitu 20 s/d
30%, semakin lama semakin meningkat. Pada
umur 38 HST yaitu 30 s/d 50%, pada umur 45
HST yaitu 50 s/d 80%. Sedangkan pada umur
52 HST semua eksplan mampu merekah
sampai 100%.Kemampuan ini
menunjukkan bahwa sel-sel eksplan masih
hidup.Sehingga respon terhadap lingkungan
tumbuhnya.Eksplan pisang yang mengalami
pemekaran dapat dilihat pada gambar 3.
Kecepatan Eksplan Berkalus
Semua kombinasi perlakuan ZPT BAP
dan IBA mampu menginduksi pembentukan
kalus dari eksplan pisang dalam media kultur,
yang dimulai dari pembengkakan eksplan,
pemekaran kelopak eksplan, kemudian disusul
oleh pembentukan kalus, sebab proses
pembelahan sel pada jaringan meristem di titik
tumbuh diikuti oleh pembesaran sel. Kalus ini
merupakan kumpulan sel yang belum
berdiferensiasi, bila sudah berdiferensiasi akan
membentuk tunas dan akar, tergantung dari zat
pengatur tumbuh yang diberikan. Adapun
kecepatan pembentukan kalus dari eksplan
pisang yang diinduksi oleh berbagai
kombinasi BAP dan IBA dapat dilihat pada
Tabel 3.
Tabel 3. Rata-rata kecepatan pembentukan kalus, warna kalus dan struktur kalus dari eksplan
pisang yang diinokulasi pada kombinasi perlakuan ZPT BAP dan IBA (HST)
Kombinasi Perlakuan ZPT BAP +
IBA
Rata-rata Kecepatan
Eksplan Berkalus ±
SE (HST)
Warna Kalus Struktur Kalus
I. BAP 2,5 ppm + IBA 0 ppm 63,00 ± 1,50 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
II. BAP 2,5 ppm + IBA 1,0 ppm 63,13 ± 1,58 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
III. BAP 2,5 ppm + IBA 2,0 ppm 63,25 ± 1,56 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
IV. BAP 5,0ppm + IBA 0 ppm 62,88 ± 1,38 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
V. BAP 5,0 ppm + IBA 1,0 ppm 63,38 ± 1,53 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
VI. BAP 5,0 ppm + IBA 2,0 ppm 63,75 ± 1,70 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
VII. BAP 10,0 ppm + IBA 0 ppm 61,88 ± 1,35 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
VIII. BAP 10,0 ppm + IBA 1,0 ppm 62,50 ± 1,63 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
IX. BAP 10,0 ppm + IBA 2,0 ppm 62,75 ± 1,98 Putih krem kehijauan Kompak dan keras
Pada Tabel 3 tampak bahwa kecepatan
pembentukan kalus dari eksplan pisang yang
diinduksi ZPT BAP 2,5 ppm yang
dikombinasikan dengan semakin
meningkatnya konsentrasi IBA dari 0 ppm
sampai 2 ppm, menghasilkan kecepatan
pembentukan kalus yang semakin lambat,
yaitu 63,00 ± 1,50 HST; 63,13 ± 1,58 HST;
dan 63,25 ± 1,56 HST. Demikian pula yang
diinduksi dengan peningkatan ZPT BAP 5,0
ppm sampai dengan 10,0 ppm yang
dikombinasikan dengan peningkatan
konsentrasi IBA dari 0 ppm sampai 2 ppm
yaitu 62,88 ± 1,38 HST; 63,38 ± 1,53 HST;
dan 63,75 ± 1,70 HST serta 61,88 ± 1,35 HST;
62,50 ± 1,63 HST; dan 62,75 ± 1,98 HST.
Jadi rata-rata pembentukan kalus yang
tercepat pada kombinasi perlakuan VII BAP
10,0 ppm + IBA 0 ppm yaitu 61,88 ± 1,35
HST dan yang paling lambat pada perlakuan
VI BAP 5,0 ppm + IBA 2,0 ppm. Konsentrasi
sitokinin BAP yang tinggi tanpa kombinasi
dengan auksin IBA menstimulir pembentukan
kalus yang lebih cepat dibandingkan
kombinasi perlakuan yang lainnya, didukung
oleh terbentuknya struktur fisiknya yang padat
dan keras.Hal ini sebab sitokinin memang
berperan pada pembelahan sel, sedangkan
auksin berperan pada pembesaran sel,
sehingga kalus seperti ini cenderung lebih
mudah berdiferensiasi untuk membentuk tunas
(Wareing and Phillips, 1981).
Warna Kalus
Penampakan warna fisik dari kalus yang
terbentuk dapat merupakan salah satu
indikator pertumbuhan dari sel yang baik atau
tidak. Biasanya awal pembentukan kalus sel-
selnya berwarna putih krem kemudian
kehijauan bila sifat tumbuhnya embrionik
sebagai responnya terhadap perlakuan media
tumbuh yang cocok warna kalus ini semakin
lama di media tumbuh bila tidak disubkultur
dan mengalami perubahan warna visual dari
eksplan titik tumbuh pisang yang diinokulasi
pada perlakuan berbagai kombinasi ZPT BAP
dan IBA dapat dilihat pada Tabel 3.
Semua kalus yang terbentuk sebagai
responsnya terhadap berbagai perlakuan
kombinasi konsentrasi ZPT BAP dan IBA
menunjukkan warna putih krem kehijauan,
semakin lama berubah sebab umur media dan
memang secara alami sesuai sifat genetiknya
pisang menghasilkan metabolit sekunder
berupa tannin. Sehingga makin lama menutupi
warna kalus yang sebenarnya. Warna
sebenarnya ini akan jelas terlihat bila bagian
luar kalus yang berwarna hitam ini di potong
pada saat subkultur ke media tanam yang baru.
Struktur Kalus
Khusus pada pisang kepok kuning ini
tampaknya kalus yang terbentuk, sifat fisiknya
tidak remah (friable), namun kompak dan keras.
Ini terbukti pada saat sub kultur dilakukan
pengirisan, kalusnya susah dipotong, harus
memakai scapel yang sangat tajam. Hasil
pengamatan struktur kalus dapat dilihat pada
Tabel 3.
Dari Tabel 3, tampak bahwa kalus yang
terbentuk sebab induksi 9 (Sembilan)
perlakuan kombinasi konsentrasi zpt BAP dan
IBA menunjukkan kesamaan fisik yaitu
kompak dana keras. Berarti ikatan sel-sel
penyusun kalus sangat erat dan tidak longgar.
Sesuai yang dinyatakan oleh Szweykowska
(dalam Street, 1974) dalam penelitiannya,
bahwa kinetin pada konsentrasi yang tinggi
menginduksi terbentuknya jaringan kalus yang
konsentrasinya lebih kompak, sebab sel-sel
penyusunan relative kecil dengan diameter ±
10µm. endoplasmic retikulumnya banyak
mengandung ribosom sehingga mikrobodi
kaya protein, plastida dalam bentuk kloroplas.
Kinetin termasuk golongan zat pengatur
tumbuh sitokinin selain BAP.
Kecepatan Eksplan Bertunas
Pengaruh kombinasi perlakuan
konsentrasi zap pengatur tumbuh (ZPT)
terhadap kecepatan pembentukan tunas dari
kalus eksplan pisang dalam media kultur,
tampaknya juga bervariasi sebagaimana pada
kecepatan pembentukan kalus tergantung pada
konsentrasi ZPT yang dipergunakan dalam
media kultur, keadaan ini dapat dilihat pada
Tabel 6.
Dari data Tabel 6, tampak bahwa terjadi
variasi waktu kecepatan pembentukan tunas
dari semua perlakuan yang diberikan, dari
perlakuan I, II, dan III BAP 2,5 ppm yang
dikombinasikan dengan konsentrasi IBA yang
semakin meningkat dari 0 ppm sampai 2 ppm,
rata-rata kecepatan bertunas semakin
meningkat ternyata kenaikan konsentrasi
auksin IBA dapat mempercepat pembentukan
tunas yaitu 76,6±0,48 HST; 76,4 ± 0,48 HST
dan 76,2 ± 0,96 HST. Demikian juga
keadaannya dengan penggunaan konsentrasi
BAP yang meningkat dari 5 ppm sampai 10
ppm yang dikombinasikan dengan IBA dari
konsentrasi 0 ppm sampai 2 ppm, yaitu
76,6±0,48 HST; 76,2±0,64 HST; 76,0±0,80
HST dan 75,8±0,32 HST; 75,4±0,72 HST dan
75,0±0,40 HST.
Jadi yang tercepat dalam pembentukan
tunasnya yaitu pada perlakuan kombinasi
konsentrasi BAP 10 ppm + IBA 2,0 ppm yaitu
75,0±0,40 HST, sedangkan yang terlambat
yaitu pada BAP 2,5 ppm + IBA 0 ppm. Hal ini
diduga sebab penggunaan konsentrasi
sitokinin BAP 10 ppm dikombinasikan dengan
auksin IBA yang rendah yaitu 2 ppm mampu
mempercepat pembentukan tunas, sesuai
dengan yang dinyatakan oleh George and
Sherrington (1984) yang menyatakan bahwa
BAP yang termasuk kelompok sitokinin
didalam kultur jaringan berperan proliferasi
tunas.
Hal ini diperjelas oleh Yusnita (2003)
bahwa konsentrasi sitokinin yang tinggi
memacu pertunasan. Hal ini juga terjadi pada
tanaman Morinta ritikulata yang dinyatakan
oleh Nair et al (2012), penambahan BAP ke
media kultur menginduksi pembentukan
tunasnya. Kalus yang diinduksi dari eskplan
oleh kombinasi perlakuan zpt BAP dan IBA
yang mulai membentuk tunas dapat dilihat
pada gambar 4, 5 dan 6.
Gambar 4. Pada kalus yang terbentuk muncul Gambar 5. Benjolan-benjolan kalus
benjolan–benjolan sel-sel embrionik berwarna kehijauan
sebagai calon pembentukan tunas.
Gambar 6. Kalus yang diinduksi dari eskplan oleh kombinasi perlakuan ZPT BAP dan IBA yang
mulai membentuk tunas.
Jumlah Tunas Yang Tumbuh Dari Kalus
Eksplan.
Semua kombinasi perlakuan
konsentrasi zat pengatur tumbuh ZPT BAP
dan IBA mampu menginduksi tunas dari kalus
eksplan pisang dalam media kultur, hanya
jumlah yang terbentuk bervariasi, sebab
tergantung dari konsentrasi ZPT yang
dipergunakan dalam media kultur, keadaan ini
dapat dilihat pada Tabel 4.
Pada Tabel 4 tampak bahwa rata-rata
jumlah tunas yang terbentuk dari kalus eksplan
pisang yang diinduksi ZPT BAP 2,5 ppm yang
dikombinasikan dengan semakin
meningkatnya konsentrasi IBA dari 0 ppm
sampai 2 ppm, menghasilkan jumlah tunas
yang semakin menurun, yaitu 2,00± 0,40
tunas, 1,80± 0,32 tunas dan 1,60± 0,48 tunas .
Demikian pula yang dinduksi dengan
peningkatan ZPT BAP 5,0 ppm sampai dengan
10 ppm yang dikombinasikan dengan
peningkatan konsentrasi IBA dari 0 sampai 2
ppm, yaitu 2,60± 0,72 tunas, 2,40± 0,48 tunas
dan 2,20± 0,32 tunas serta 3,80± 1,76 tunas,
3,20± 0,64 tunas dan 2,80± 0,96 tunas. Jadi
rata-rata jumlah tunas yang tumbuh dari kalus
eksplan pisang yang terbanyak pada
kombinasi perlakuan VII BAP 10 ppm + IBA
0 ppm yaitu 3,80± 1,76 tunas per eksplan,
sedangkan yang paling sedikit pada kombinasi
perlakuan BAP 2,5 ppm + IBA 2 ppm.
Konsentrasi sitokinin BAP yang tinggi tanpa
kombinasi auksin IBA, menstimulasi
pembentukan tunas yang terbanyak
dibandingkan dari kombinasi perlakuan
lainnya. Sesuai yang dinyatakan oleh George
and Sherrington (1984) bahwa konsentrasi
sitokinin yang tinggi menstimulir
pembentukkan tunas kalus eksplan dalam
media kultur. Diperjelaas oleh Thirupathi el al
(2013) bahwa ZPT BAP merupakan sitokinin
yang paling baik dibandingkan jenis sitokinin
lainnya dalam menghasilkan tunas.
Kecepatan Pembentukan Akar Dari Tunas
Kalus Eksplan
Pengaruh sembilan kombinasi
perlakuan konsentrasi zat pengatur tumbuh
(ZPT) BAP dan IBA terhadap pembentukan
akar dari tunas yang terbentuk dari kalus
eksplan, tampaknya walaupun akar dapat
tumbuh namun tidak berkembang sempurna,
sehingga kurang survive bila diaklimatisasi,
oleh sebab itu perlu disubkulturkan ke media
induksi akar, dengan meningkatkan
konsentrasi auksin IBA 10 ppm. Kecepatan
pembentukan akar dapat dilihat pada Tabel 4.
Dari Tabel 4 dapat diketahui bahwa
semakin meningkatnya konsentrasi sitokinin
BAP dari 2,5 ppm sampai 10 ppm yang
dikombinasikan dengan konsentrasi auksin
IBA yang rendah, memperlambat kecepatan
pembentukan akar dari tunas asal kalus
eksplan pisang yang dikulturkan. Sesuai
dengan yang dinyatakan George and
Sherrington(1984) bahwa konsentrasi
sitokinin yang tinggi menstimulir
pembentukan tunas sebaliknya konsentrasi
auksin yang tinggi menstimulir pembentukan
akar. Diperjelas oleh Wattimena (1992)
mofogenesis eksplan tergantung pada
keseimbangan auksin dan sitokinin di dalam
media dan interaksi antar zat pengatur tumbuh
endogen di dalam tumbuhan dan ZPT eksogen
yang diserap media tumbuh.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Dari hasil dan pembahasan penelitian
yang telah dilaksanakan, dapat disimpulkan
bahwa :
1. Dari semua kombinasi perlakuan zat
pengatur tumbuh BAP dan IBA mampu
menginduksi pertumbuhan dan
perkembangan eksplan pisang dalam
media kultur,mulai membengkak,
merekah kelopak penutup titik tumbuh,
berkalus dan bertunas walaupun
persentase jumlah dan kecepatannya
bervariasi.
2. Kalus yang terbentuk warnanya krem
kehijauan, sedangkan strukturnya padat
dan keras. kalus demikian cenderung
lebih mudah bertunas.
3. Pembentukan jumlah tunas yang
terbanyak dari kalus eksplan pisang kepok
kuning pada perlakuan VII kombinasi
konsentrasi BAP 10 ppm + IBA 0
ppm,yaitu 3.80 ± 1,76 tunas/ eksplan pada
setiap sub kultur namun perakaran yang
terbentuk tidak berkembang sempurna,
sehingga perlu disubkultur pada media
induksi akar IBA 10 ppm, maka terbentuk
“plantlet” bibit mini tanaman pisang yang
lengkap.
Disarankan agar penelitian tahun ke I
(2015) ini dilanjutkan lagi kepenelitian tahun
ke II (2016) untuk membuktikan bahwa bibit
pisang kepok kuning asasl kultur jaringan ini,
bila ditanam dan dipelihara secara intensif
dapat berproduksi dengan kuantitsa dan
kualitas yang baik dan bebas penyakit
.jpeg){kind=small}